PlantBiotech:Species/Solanum lycopersicum

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image:トマト遺伝子導入実験プロトコール_img_032.jpg|70%EtOH 2分振とう
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Image:トマト遺伝子導入実験プロトコール_img_032.jpg|70%EtOH 2分振とう
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image:トマト遺伝子導入実験プロトコール_img_034.jpg|1%次亜塩+200μl/L tween 10分振とう
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Image:トマト遺伝子導入実験プロトコール_img_034.jpg|1%次亜塩+200μl/L tween 10分振とう
 
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クリーンベンチ作業
 
クリーンベンチ作業
 
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image:トマト遺伝子導入実験プロトコール_img_041.jpg|洗浄前
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Image:トマト遺伝子導入実験プロトコール_img_041.jpg|洗浄前
image:トマト遺伝子導入実験プロトコール_img_042.jpg|SDWで1分間×5回洗浄
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Image:トマト遺伝子導入実験プロトコール_img_042.jpg|SDWで1分間×5回洗浄
image:トマト遺伝子導入実験プロトコール_img_043.jpg|洗浄後
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Image:トマト遺伝子導入実験プロトコール_img_043.jpg|洗浄後
 
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  種子の沈殿が洗浄の目安。洗浄が甘いと発芽が悪くなる。
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===播種===
 
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クリーンベンチ作業
 
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image:トマト遺伝子導入実験プロトコール_img_051.jpg|1/2MS+3%Suc+0.8%Agar pH5.8 25℃,16時間の日長
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Image:トマト遺伝子導入実験プロトコール_img_051.jpg|1/2MS+3%Suc+0.8%Agar pH5.8 25℃,16h日長で培養]
image:トマト遺伝子導入実験プロトコール_img_052.jpg|50-60粒/7cm<br>マヨネーズ瓶
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Image:トマト遺伝子導入実験プロトコール_img_052.jpg|50-60粒/7cm<br>マヨネーズ瓶
image:トマト遺伝子導入実験プロトコール_img_053.jpg|50粒播種するとこんな感じ→約1週間培養
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Image:トマト遺伝子導入実験プロトコール_img_053.jpg|50粒播種するとこんな感じ<br>→約1週間培養
 
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===前培養===
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クリーンベンチ作業
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|[[Image:トマト遺伝子導入実験プロトコール_img_061.jpg|160px|thumb|作業は湿らせたろ紙の上で子葉を傷つけないように<br>胚軸は下の方を使う<br>子葉の両端を切る]]
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|→湿らしたろ紙へ一時置き→
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|[[Image:トマト遺伝子導入実験プロトコール_img_062.jpg|160px|thumb|MS+2mg/l Zeatin+3%Suc+0.8%Agar 48切片/1シャーレ(9cm深底シャーレ)<br>パラフィルムでシール<br>→2日間,25℃,16h日長で培養]]
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  本葉が出たものはNG。
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  作業中乾かないように注意!
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  子葉は必ず背軸面が培地に触れるように置床。

Revision as of 15:35, 4 July 2011

Contents

トマト遺伝子導入実験プロトコール

200px

2005.6/27改正版


形質転換スケジュール

200px
 月曜日
 シングルコロニーの培養
 除菌・選抜(1回目)
 ↓
 水曜日
 トマト播種
  トマト前培養
 感染用アグロの培養
 ↓
 金曜日
 感染
 ↓
 以降2週間おきに選抜


実験プロトコール

滅菌


洗浄

クリーンベンチ作業

播種

クリーンベンチ作業


前培養

クリーンベンチ作業

File:トマト遺伝子導入実験プロトコール img 061.jpg
作業は湿らせたろ紙の上で子葉を傷つけないように
胚軸は下の方を使う
子葉の両端を切る
→湿らしたろ紙へ一時置き→
File:トマト遺伝子導入実験プロトコール img 062.jpg
MS+2mg/l Zeatin+3%Suc+0.8%Agar 48切片/1シャーレ(9cm深底シャーレ)
パラフィルムでシール
→2日間,25℃,16h日長で培養
  • point

  本葉が出たものはNG。   作業中乾かないように注意!   子葉は必ず背軸面が培地に触れるように置床。

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